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Medalis : RCPG, douleur et inflammation - IrebsÉquipe : RCPG, douleur et inflammation

Domaines d'expertise
Compétences scientifiques
Savoir-faire technique
Biochimie Fractionnement subcellulaire Membranes de cerveau ou d'aires cérébrales (rat) - Centrifugation différentielle ou isopycnique - Marqueurs d'éléments subcellulaires (enzymatiques, recapture transmetteurs, liaison de radioligands,...)
Marquage irréversible de RCPG Marqueurs d'affinité et de photo-affinité - Marqueurs froids et radioactifs - Méthodes de marquage de récepteurs membranaires ou purifiés - Méthodes discriminatives liaison réversible et irréversible - Quantification
Solubilisation de RCPG Conditions de solubilisation - Choix de détergents - Critères opérationnels de solubilisation - État macromoléculaire dispersé - Méthodes de mesure de liaison de ligands à des RCPG solubilisés
Purification de RCPG Chromatographie d'affinité via ligand du récepteur - Anticorps anti-Flag - Complexe Nickel/Tag His
Techniques classiques d'analyse des protéines Gels natifs et dénaturants - Western blot -  Interactions protéine-protéine
Biologie cellulaire RCPG, trafic membranaire, signalisation intracellulaire Dynamique des interactions moléculaires en cellules vivantes et en temps réel en utilisant des protéines de fusion couplées à des fluorophores permettant des analyses biophysiques (luminescence, fluorescence, BRET, FRET) - Microscopie - Spectrofluorimétrie et lecture miniaturisée en 96-puits - Mesures de différentes voies de signalisation activées par les RCPG
Établissement de lignées cellulaire exprimant des RCPG recombinants RCPG natifs, fusionnés à EGFP, EYFP, Flag, Tag His - Expression transitoire et stable dans différents types de cellules (HEK293, CHO, …)
Pharmacologie in vitro Binding : interaction R-L avec radioligands et ligands fluorescents Théorie et applications diverses - Mise en œuvre des conditions de mesure de liaison spécifique de radioligands à divers récepteurs de neurotransmetteurs (récepteurs muscariniques, adrénergiques, opioide mu, 5-HT2, D2, chimiokines, RF-amides, …) - Criblage de chimiothèque - Définition sites orthostériques vs sites allostériques portés par un RCPG - Interaction R-L par FRET à l'état stationnaire (intensité de fluorescence), par FRET en temps résolu (durée de vie de fluorescence), par FLIM - Mesure d'oligomérisation R-L par spectrométrie de corrélation en fluorescence
Pharmacologie in vivo Différents modèles de douleurs (neuropathique, inflammatoire, hyperalgésie induite par les opiacés) - Phénotypage global de souris génétiquement modifiées

Contact : Frédéric SIMONIN

Localisation : Irebs, Pôle API - Strasbourg Illkirch

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